多聚组氨酸标签(His-tag)介绍及应用案例分享


示例1:Ni-NTA Sanarose 6FF纯化蛋白A

层析柱信息:5mL预装柱

缓冲体系:

Binding Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,10mM Imidazole,pH 8.0

Wash Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,50mM Imidazole,pH 8.0

Elution Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,200mM Imidazole,pH 8.0

纯化方案:

► 平衡:Binding Buffer平衡5CV,流速2mL/min;

► 上样:流速2mL/min,上样体积50mL;

► 洗杂:Wash Buffer洗杂3cv,流速2mL/min;

► 洗脱:Elution Buffer洗脱并收集目的蛋白;

纯化结果电泳检测:

图一 Ni-NTA Sanarose 6FF纯化蛋白A电泳检测结果

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示例2:Ni-IDA Sanarose 6FF纯化蛋白G

层析柱信息:5mL预装柱

缓冲体系:

Binding Buffer:50mM Tris-HCl,500mM NaCl,10mM Imidazole,pH 9.0

Wash Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,50mM Imidazole,pH 9.0

Elution Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,200~500mM Imidazole,pH 9.0

纯化方案:

►平衡:Binding Buffer平衡5CV,流速2mL/min;

► 上样:流速2mL/min,上样体积50mL;

►  洗杂:Wash Buffer洗杂3cv,流速2mL/min;

► 洗脱:Elution Buffer洗脱并收集目的蛋白;

纯化结果电泳检测:

图二 Ni-IDA Sanarose 6FF纯化蛋白A电泳检测结果

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