多聚组氨酸标签(His-tag)介绍及应用案例分享
示例1:Ni-NTA Sanarose 6FF纯化蛋白A
层析柱信息:5mL预装柱
缓冲体系:
Binding Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,10mM Imidazole,pH 8.0
Wash Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,50mM Imidazole,pH 8.0
Elution Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,200mM Imidazole,pH 8.0
纯化方案:
► 平衡:Binding Buffer平衡5CV,流速2mL/min;
► 上样:流速2mL/min,上样体积50mL;
► 洗杂:Wash Buffer洗杂3cv,流速2mL/min;
► 洗脱:Elution Buffer洗脱并收集目的蛋白;
纯化结果电泳检测:
图一 Ni-NTA Sanarose 6FF纯化蛋白A电泳检测结果

示例2:Ni-IDA Sanarose 6FF纯化蛋白G
层析柱信息:5mL预装柱
缓冲体系:
Binding Buffer:50mM Tris-HCl,500mM NaCl,10mM Imidazole,pH 9.0
Wash Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,50mM Imidazole,pH 9.0
Elution Buffer:50mM Tris-HCl,150mM NaCl,200~500mM Imidazole,pH 9.0
纯化方案:
►平衡:Binding Buffer平衡5CV,流速2mL/min;
► 上样:流速2mL/min,上样体积50mL;
► 洗杂:Wash Buffer洗杂3cv,流速2mL/min;
► 洗脱:Elution Buffer洗脱并收集目的蛋白;
纯化结果电泳检测:
图二 Ni-IDA Sanarose 6FF纯化蛋白A电泳检测结果
